„Pokud naše počáteční výsledky mohou být replikovány jinými laboratořemi, změní to, jak v současné době přemýšlíme o příčinách Alzheimerovy choroby, “ říká Dr. Ramón Trullas, profesor výzkumu na Vyšší radě pro vědecký výzkum (CSIC) ) v Biomedicínském výzkumném ústavu v Barceloně a vedoucí autor studie. Podle jeho názoru by tento objev mohl umožnit hledání účinnějších léčeb v předklinické fázi.
V současné době je jediným způsobem, jak přesně diagnostikovat nemoc, postmortální neuropatologická analýza. Vztah mezi známými biomarkery s onemocněním je nejasný, takže je téměř nemožné diagnostikovat preklinické fáze se skutečnou jistotou.
Vědci CSIC ve své práci ukazují, že pokles obsahu mitochondriální DNA (mtDNA) v CSF může být předklinickým ukazatelem Alzheimerovy choroby; a na druhé straně, že může existovat přímý příčinný vztah. Hypotéza je taková, že snížení hladin mitochondriální DNA v CSF odráží snížení schopnosti mitochondrií krmit mozkové neurony, což způsobuje jejich smrt.
Snížení koncentrace mtDNA předchází vzniku známých biochemických biomarkerů Alzheimerovy choroby (beta-amyloid 1-42, T-tau a p-tau proteiny), což naznačuje, že patofyziologický proces Alzheimerovy choroby Začíná dříve, než se původně předpokládalo, a že jeho vyčerpání v mtDNA může být jedním z prvních prediktorů onemocnění.
Kromě umožnění zkoumání možného příčinného vztahu mtDNA a progrese Alzheimerovy choroby, použití mtDNA jako indexu preklinické Alzheimerovy choroby poskytuje důležitou výhodu oproti předchozím biochemickým markerům: detekce tohoto nového biomarkeru nukleové kyseliny Chybí mu technické potíže spojené s detekcí proteinů. MtDNA lze snadno kvantifikovat pomocí kvantitativní nebo real-time PCR (qPCR) nebo „Doplet Digital PCR“ (ddPCR).
Před touto studií vědci neuvedli, že volné buňky cirkulující v mtDNA mohou být detekovány v lidském CSF. Avšak díky této studii byl tým Dr. Trullas schopen kvantitativně detekovat a reprodukovat mtDNA pomocí qPCR, pečlivě optimalizované podle pokynů MIQE.
Absolutní kvantifikace cílových molekul
K ověření svých výsledků pomocí qPCR vědci použili digitální PCR systém QX100 Droplet od Bio-Rad Laboratories. Na rozdíl od testů qPCR poskytuje systém QX100 absolutní kvantifikaci cílových molekul DNA bez nutnosti standardní křivky. Důležitým faktorem pro analýzu CSF bylo to, že systém „Doplet Digital PCR“ nevyžaduje čištění vzorku k odstranění inhibitorů PCR, jak je nezbytné pro testy qPCR.
„Doplet Digital PCR“ nám umožnil ověřit počáteční měření qPCR, protože poskytuje absolutní kvantifikaci na úrovni jediné molekuly, aniž by se spoléhal na standardní křivku, “vysvětluje Trullas. "Jak bude technologie stále více přijímána, očekáváme, že ddPCR bude budoucností detekce mitochondriální DNA v mozkomíšním moku, " dodává.
Dr. Trullas doufá, že další laboratoře a nemocnice budou úspěšně replikovat výsledky výzkumu své skupiny, což by potvrdilo, že by snížené hladiny mtDNA měly být vyšetřeny jako možná příčina Alzheimerovy choroby. Nalezením způsobu, jak blokovat tuto degeneraci, dokážou lékaři diagnostikovat a léčit Alzheimerovu chorobu dříve, než se objeví příznaky.
Zdroj: www.DiarioSalud.net
